有一次，与同事还有某社区医院检验科一朋友一起吃饭；在谈论社区检验时，朋友一直吐槽半自动生化分析仪，而同事爆出惊人言语：为什么不用「读板机」（酶标仪俗称）做生化？！我们都以为他在说醉话，同事却要用实验数据说话。

验证过程

1. 原理：酶标仪就是一台光电比色计或分光光度计，采用朗伯 - 比尔定律，单色光从塑料微孔的上方照射，通过小孔中的试剂与标本反应的有色溶液，一部分光被吸收，透过该溶液的另一部分光经微孔下方的接收器转换为电信号，显示于外接电脑。

2. 器材与试剂：酶标仪、（未包被）空白塑料微孔板、加样枪；血糖试剂（终点法，手工或半自动生化分析仪）。

3. 「线性血清」：选取该生化项目终点法线性范围内的 6 个不同浓度血清（用标准品最好），随标本一起检测。这样，我们就可以根据 6 个不同浓度血清对应的吸光度，根据线性回归关系得到一个计算公式：浓度 = 系数乘吸光度（C = bA，）。与我们上一篇文章中提到的方法很类似，大家可以参考。

4. 试剂空白对照孔：设置一个试剂空白对照孔，扣除试剂本身对吸光度的影响。

5. 试剂与标本加入量比例调试，二者混合后的反应溶液总量不能超过微孔容量，例如某酶标仪要求不超过 250 微升。该比例需保证不出现试剂耗尽等等情况，即保证其反应在最适范围内。先加标本，再加入试剂（用排枪更好），减少微孔之间的反应时间误差。

6. 微孔分配：常见的微孔板有 8*12 个孔，一板最多可以做 96 份标本；一般设一个试剂空白对照孔、6 个「线性血清」孔和 89 个标本孔。

7. 温浴：温度与时间按照试剂说明书要求。

8. 读板：读取各孔的 OD 值（就是吸光度），扣除试剂空白，求取浓度与吸光度的线性公式，将标本孔吸光度代入线性公式中，最后得到标本浓度。（EXCEL 表批量处理很简单）

分析总结

1. 半自动生化分析仪的缺点

随着检验技术的发展，在县级以上医院或经济条件较好的县级以下医疗单位，基本实现了全自动生化分析，半自动生化分析仪有被完全淘汰的趋势。但是，半自动生化分析仪因为仪器、试剂、消耗的低成本，在目前许多小的医疗单位还有一定的生存空间，而且半自动生化分析仪比手工生化操作（紫外分光光度计法）操作相对简便、快速等等。

但是，相对于酶标仪，半自动生化分析仪也有其不足之处，容易出现交叉污染、结果不稳定、需要的试剂量比较大等等。

2. 酶标仪做生化的优点与不足

与半自动生化分析仪相比，酶标仪做生化项目的优点：可以同时检测 96 个样本，大大提高了检测速度，节省了工作时间和空间；损耗试剂量少，节省了成本；标本检测时的重复性、稳定性好；同批次操作自带「线性」参考，扣除了试剂空白，结果更精准；不需要液路冲洗，也避免了交叉污染。

不足：只在血糖终点法进行了验证，对于其是否也可以应用于其它方法，尚需实验探讨，目前，有血站关于做 ALT 的研究报道。半自动生化分析仪有多个波长可供选择，而酶标仪仅有两个波长，有研究指出，出现最大吸收峰的波长为实验的推荐波长；然而，并非其它波长不可使用，只是对不同浓度标本的吸光度的区分度有所下降而已。

3. 酶标仪应用前景

在检验工作中，酶标仪经常应用于免疫室定性实验微孔板的检测，是对酶联免疫检测实验结果进行读取和分析的专业仪器。在临床检验、生物学研究、农业科学、食品和环境科学中，特别是随着多种酶联免疫检测试剂盒的研发，酶标仪得到了广泛的应用；在医学检验的乙肝五项、艾滋病检测、丙肝检测、优生五项、激素检测等等方面，酶标仪均有涉猎。

酶标仪所做的生化项目，均需要实验验证方可，实验数据是检验的喉舌；对于小的医疗单位，可以在接收社区大批量体检时应用；本文仅对酶标仪的拓展应用进行理论探讨。

作者：位冒冒，河南省安阳市人民医院检验科

参考文献：

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